在人體免疫系統中，B淋巴細胞扮演著“抗體工廠”的角色。當病原體入侵時，每個B細胞會識別抗原上的特定表位，并產生相應的抗體。然而，天然免疫應答會產生多種抗體——這就是多克隆抗體。而單克隆抗體(單抗)則是一種由單一B細胞克隆產生的、針對單一抗原表位的均一抗體。那么，科學家如何將這種精密的生物機制轉化為實驗室中的標準流程呢？
 

　　單抗制備的基本原理是細胞融合與篩選，可概括為三個關鍵步驟：
 

　　一：免疫與B細胞獲取
 

　　將目標抗原(如病毒蛋白或腫瘤標志物)注入實驗動物(通常是小鼠)體內，刺激其脾臟中的B細胞增殖分化。經過數次免疫后，脾臟中會富集大量能產生目標抗體的B細胞。
 

　　二：細胞融合
 

　　取出免疫小鼠的脾細胞，與骨髓瘤細胞(一種無限增殖的腫瘤細胞)混合，在聚乙二醇或電融合技術作用下，兩種細胞發生融合。融合后的細胞稱為雜交瘤細胞。這些雜交瘤細胞繼承了B細胞的抗體分泌能力和骨髓瘤細胞的無限增殖特性。
 

　　三：篩選與克隆
 

　　融合產物中既有未融合的脾細胞(壽命短)、未融合的骨髓瘤細胞(需剔除)，也有目標雜交瘤細胞。通過HAT選擇性培養基(含次黃嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷)，未融合的骨髓瘤細胞因缺乏關鍵酶而死亡，脾細胞自然凋亡，只有雜交瘤細胞存活。隨后，通過有限稀釋法將單個雜交瘤細胞分離培養，并檢測其分泌的抗體是否針對目標抗原。陽性克隆經擴大培養后，即可持續生產均一的單克隆抗體。

 

　　相比傳統多克隆抗血清，單抗制備技術帶來的優勢主要體現在以下方面：
 

　　1. 高度特異性
 

　　單抗只識別一個抗原表位，避免了交叉反應。在臨床診斷中，這意味著檢測結果更可靠——例如在HIV檢測中，單抗能準確區分病毒蛋白與宿主自身蛋白。
 

　　2. 批次間一致性
 

　　雜交瘤細胞系一旦建立，即可在液氮中長期保存。每次復蘇后生產的抗體在親和力、效價和亞型上基本一致，這為藥物生產和診斷試劑標準化提供了基礎。
 

　　3. 無限供應能力
 

　　雜交瘤細胞可像工廠一樣持續培養，理論上能無限生產同一種抗體。這一特性使單抗成為治療性蛋白藥物的理想載體——例如用于自身免疫疾病治療的抗TNF-α單抗，需要長期、穩定地供應給患者。
 

　　4. 可工程化改造
 

　　通過基因工程技術，可將鼠源單抗的恒定區替換為人源序列(人源化)，降低免疫原性；或構建雙特異性抗體、抗體藥物偶聯物等新型分子。這種靈活性使單抗成為靶向治療的基石。